Hiper-IgE sendromunda Th17 farklılaşması; IL-17 salınımı ve ROR?t gösterimi

Tunç Akkoç, İsmail Öğülür, Ayzer Tevetoğlu, Ayşegül İzgi, Ö̈zden Hatırnaz-Ng, Yuk Yin-Ng, Barış Safa, Elif Aydıner-Karakoç
953 763

Öz


Amaç: Hiper-IgE sendromu (HIES), enfeksiyona duyarlılık ve düşük sayıdaki Th17 hücreleri ile karakterize edilir. Th17 hücreleri fungal ve hücre dışı bakteriyel enfeksiyonların eliminasyonunda önemli rol oynarlar. Bu çalışmada amacımız, HIES hastaları ve sağlıklı kontroller arasında interlökin 17 (IL-17) salgılanması ve ……. (ROR?t) ekspresyonunun ölçülmesi ile Th17 hücrelerinin farklılaşmasını araştırmaktır.

Yöntem: Çalışmaya 3 adet HIES tanısı almış çocuk ve 4 adet sağlıklı kontrol alındı. HIES skorları değerlendirildi ve hastaların klinik verileri hastane kayıtlarından toplandı. Th17 farklılaşması, ELİSA yöntemi ile IL-17 üretiminin ve gerçek zamanlı PZR yöntemi ile ROR-?t ekpresyonunun ölçülmesiyle değerlendirildi.

Bulgular: HIES hastalarında, peripheral kan mononükleer hücreler (PKMH) ve CD45+RA naif T hücreler Th17 farklılaştırma koşullarında kültüre edildiğinde, IL-17 sitokin seviyesinde sağlıklı bireylere göre önemli derecede azalma gözlendi. Buna ek olarak, sağlıklı kontrollerin IL-17 seviyeleri forbol 12-miristat 13-asetat (FMA) ve iyonomisin uyarımlı durumda uyarımsız duruma göre daha yüksek bulundu. Ayrıca PKMH kültürlerinde IL-17 seviyesi FMA ve iyonomisin uyarımlı durumda, HIES hastaları ve sağlıklı kontroller için uyarımsız koşullarla karşılaştırıldığı zaman önemli derecede yüksek gözlendi. HIES hastasında uyarılmış PKMH’lerdeki ROR?t ekspresyon seviyesi, sağlıklı kontrolün yarı düzeyinde olarak tespit edildi.

Sonuç: IL-17 salgılanması ve ROR-?t ifadesinin değerlendirilmesi mutasyon analizleri için aday olan hastaları belirlemek için yapılmalıdır. Ülkemizde bu adımların uygulanması ve bilinen mutasyonları olmayan HIES hastalarının seçimi, yeni genetik bozuklukların keşfedilmesine ve böylece yeni tedavi yaklaşımlarına olanak sağlayacaktır.
Anahtar Kelimeler : Th17, interlökin 17 (IL-17), …. (ROR-?t), Hiper-IgE sendromu (HIES)

Anahtar kelimeler


Th17, interlökin 17 (IL-17), RAR-bağımlı orphan reseptör gama t (ROR-γt), Hiper-IgE sendromu (HIES)

Tam metin:

PDF

Referanslar


Miossec P, Korn T, Kuchroo VK. Interleukin-17 and type 17 helper T cells. N Engl J Med. 2009;361:888-898.

Kolls JK, McCray PB, Chan YR. Cytokine-mediated regulation of antimicrobial proteins. Nat Rev Immunol. 2008;8:829-835.

Hemdan NY, Birkenmeier G, Wichmann G, Abu El-Saad AM, Krieger T, Conrad K, Sack U. Interleukin-17-producing T helper cells in autoimmunity. Autoimmun Rev. 2010;9:785-792.

Milner JD, Brenchley JM, Laurence A, Freeman AF, Hill BJ, Elias KM, Kanno Y, Spalding C, Elloumi HZ, Paulson ML, Davis J, Hsu A, Asher AI, O’Shea J, Holland SM, Paul WE, Douek DC. Impaired T(H)17 cell differentiation in subjects with autosomal dominant hyper IgE syndrome. Nature. 2008;452:773-776.

Lin L, Ibrahim AS, Xu X, Farber JM, Avanesian V, Baquir B, Fu Y, French SW, Edwards JE Jr, Spellberg B. Th1-Th17 cells mediate protective adaptive immunity against Staphylococcus aureus and Candida albicans infection in mice. PLoS Pathog. 2009;5:e1000703.

Saijo S, Ikeda S, Yamabe K, Kakuta S, Ishigame H, Akitsu A, Fujikado N, Kusaka T, Kubo S, Chung SH, Komatsu R, Miura N, Adachi Y, Ohno N, Shibuya K, Yamamoto N, Kawakami K, Yamasaki S, Saito T, Akira S, Iwakura Y. Dectin-2 recognition of alpha-mannans and induction of Th17 cell differentiation is essential for host defense against Candida albicans. Immunity. 2010;32:681-691.

Cederlund A, Olliver M, Rekha RS, Lindh M, Lindbom L, Normark S, Henriques-Normark B, Andersson J, Agerberth B, Bergman P. Impaired Release of Antimicrobial Peptides into Nasal Fluid of HyperIgE and CVID Patients. PLoS One. 2011;6(12):e29316.

Grimbacher B, Holland SM, Gallin JI, Greenberg F, Hill SC, Malech HL, Miller JA, O’Connell AC, Puck JM. Hyper-IgE syndrome with recurrent infections-an autosomal dominant multisystem disorder. N Engl J Med. 1999;340:692-702.

Minegishi Y. Hyper-IgE syndrome. Curr Opin Immunol. 2009;21:4874

Holland SM, DeLeo FR, Elloumi HZ, Hsu AP, Uzel G, Brodsky N, Freeman AF, Demidowich A, Davis J, Turner ML, Anderson VL, Darnell DN, Welch PA, Kuhns DB, Frucht DM, Malech HL, Gallin JI, Kobayashi SD, Whitney AR, Voyich JM, Musser JM, Woellner C, Schäffer AA, Puck JM, Grimbacher B. STAT3 mutations in the hyper-IgE syndrome. N Engl J Med. 2007;18:1608-1619.

Engelhardt KR, McGhee S, Winkler S, Sassi A, Woellner C, LopezHerrera G, Chen A, Kim HS, Lloret MG, Schulze I, Ehl S, Thiel J, Pfeifer D, Veelken H, Niehues T, Siepermann K, Weinspach S, Reisli I, Keles S, Genel F, Kutukculer N, Camcioğlu Y, Somer A, Karakoc-Aydiner E, Barlan I, Gennery A, Metin A, Degerliyurt A, Pietrogrande MC, Yeganeh M, Baz Z, Al-Tamemi S, Klein C, Puck JM, Holland SM, McCabe ER, Grimbacher B, Chatila TA. Large deletions and point mutations involving the dedicator of cytokinesis 8 (DOCK8) in the autosomal-recessive form of hyper-IgE syndrome. J Allergy Clin Immunol. 2009;124:1289-1302.

Minegishi Y, Saito M, Tsuchiya S, Tsuge I, Takada H, Hara T, Kawamura N, Ariga T, Pasic S, Stojkovic O, Metin A, Karasuyama H. Dominantnegative mutations in the DNA-binding domain of STAT3 cause hyper-IgE syndrome. Nature. 2007;448:1058-1062.

Zhang Q, Davis JC, Lamborn IT, Freeman AF, Jing H, Favreau AJ, Matthews HF, Davis J, Turner ML, Uzel G, Holland SM, Su HC. Combined immunodeficiency associated with DOCK8 mutations. N Engl J Med. 2009;361:2046-2055. 10 Warning Signs of Primary Immunodeficiency, web site: http:// www.info4pi.org/

Akkoç T, Tevetoğlu A, Öğülür İ, İzgi A, Aydıner EK, Barış S, Bahçeciler N, Barlan I. Investigation of Th17 cell differentiation in immunodeficiencies associated with high IgE levels and/or autoimmunity. MÜSBED. 2011; 1(2):96-102.

Vandesompele J, De Preter K, Pattyn F, Poppe B, Van Roy N, De Paepe A, Speleman F. Accurate normalization of real-time quantitative RT-PCR data by geometric averaging of multiple internal control genes. Genome Biol. 2002;3(7):RESEARCH0034.

Livak KJ, Schmittgen TD. Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2(-Delta Delta C(T)) Method. Methods. 2001;25(4):402-408.

Al Khatib S, Keles S, Garcia-Lloret M, Karakoc-Aydiner E, Reisli I, Artac H, Camcioglu Y, Cokugras H, Somer A, Kutukculer N, Yilmaz M, Ikinciogullari A, Yegin O,Yüksek M, Genel F, Kucukosmanoglu E, Baki A, Bahceciler NN, Rambhatla A, Nickerson DW, McGhee S, Barlan IB, Chatila T. Defects along the T(H)17 differentiation pathway underlie genetically distinct forms of the hyper IgE syndrome. J Allergy Clin Immunol. 2009;124(2):342-348.